大型层析柱是凝胶层析技术中的主体，一般用玻璃管或有机玻璃管。层析柱的直径大小不影响分离度，样品用量大，可加大柱的直径，一般制备用凝胶柱，直径大于2厘米，但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外， 直径加大，洗脱液体体积增大，样品稀释度大。分离度取决于柱高，为分离不同组分，凝胶柱床必须有适宜的高度，分离度与柱高的平方根相关。大型层析柱

　　以中压柱层析法提取分离冬凌草甲素为例

　　1 吸附剂的处理及柱子装填

　　将一定量薄层层析硅胶装人搪瓷盘置于烘箱中，取出放置室温即可装柱。柱子采用干法填充，填满整个柱体，不留死体积，密封后用柱塞式计量溶剂泵按丙酮一石油醚比例泵人溶剂，至溶剂流出止。

　　2 上样

　　3 洗脱

　　至洗脱完全，相同流份合并，回收溶剂。将冬凌草甲素流份合并蒸干。加人适量甲醇热溶后自然放置，析出结晶，为冬凌草甲素。

　　4 层析柱再生、平衡

　　5 重结晶

　　冬凌草甲素结晶析出完全后，减压过滤，然后用少量甲醇洗涤(洗涤液保存，作下次热溶冬凌草甲素用)。将冬凌草甲素再用适量甲醇热溶后放置，结晶再次析出，待结晶完全后，抽滤，用少量乙醚洗涤，将结晶室温下晾干后置真空干燥箱中，真空干燥至恒重。密封于瓶中，置干燥器中保存。

　　6 薄层层析分析

　　表明在该展开系统下，冬凌草甲素样品和对照品都具有相同的RF值，并呈现出同样的蓝绿色斑点，在制备的冬凌草甲素样品中，没有杂质斑痕。大型层析柱